1.樣品預(yù)處理
在進(jìn)行蛋白純化之前，需要對樣品進(jìn)行一系列的預(yù)處理步驟，如細(xì)胞破碎、沉淀去除、濃縮等。這些步驟可以根據(jù)樣品的性質(zhì)和純化目標(biāo)的要求進(jìn)行優(yōu)化。
2.柱選擇和校準(zhǔn)
根據(jù)純化目標(biāo)的性質(zhì)，選擇合適的純化柱和適當(dāng)?shù)牟僮鳁l件。在使用新柱之前，需要進(jìn)行柱的校準(zhǔn)，確保純化效果的準(zhǔn)確和可靠。
3.樣品加載
將經(jīng)過預(yù)處理的樣品通過樣品自動進(jìn)樣器加載到蛋白純化系統(tǒng)中。在加載過程中，可以根據(jù)需要選擇不同的加載速度和樣品體積。
4.洗脫條件優(yōu)化
根據(jù)純化目標(biāo)的性質(zhì)和樣品的特點(diǎn)，優(yōu)化洗脫緩沖液的條件，使目標(biāo)蛋白從純化柱上得到的洗脫效果。
5.蛋白收集和分析
將洗脫得到的目標(biāo)蛋白進(jìn)行收集，并進(jìn)行蛋白含量測定和純度分析。收集到的蛋白可以用于后續(xù)的實(shí)驗(yàn)研究或應(yīng)用。